Кишечная палочка по грамму
Эшерихии (род Escherichia)
Эшерихии – палочковидные бактерии,
относящиеся к семейству Enterobacteriaceae,
роду Escherichia, который состоит из 5
видов (E. coli, E. fergusonii, E. hermannii, E. vulneris, E. blattae).
Типовой вид E.coli, имеет наибольшее
значение в медицине. Заболевания, вызываемые E.coli, называются эшерихиозами.
По антигенным и токсигенным свойствам
возбудителей разделяют на условно-патогенные и
патогенные кишечные палочки: условно-патогенные
кишечные палочки – комменсалы
(представители нормальной микрофлоры кишки),
возбудители оппортунистических
инфекций (парентеральных эшерихиозов) в виде
сепсиса, перитонита, цистита т.д.; патогенные,
или диареегенные кишечные палочки,
вызывающие энтеральные эшерихиозы
(гастроэнтериты, колиты и др.).
Чистая | Колонии |
Эшерихии – | |
Заболевания, вызываемые диареегенными
Escherichia coli
| Энтеротоксигенные кишечные палочки (ЭТКП) с преобладанием холероподобного экзотоксина. Поражается тонкая кишка | Пили, термолабильный | Диарея |
| Энтероинвазивные кишечные палочки (ЭИКП) с преобладанием факторов инвазии и последующим разрушением эпителия толстой кишки | Поверхностные белки, | Дизентериеподобное |
| Энтеропатогенные кишечные палочки (ЭПКП), разрушающие микроворсинки и повреждающие апикальную часть эпителия тонкой кишки | Белок-адгезин наружной | Диарея у детей 1 года жизни |
| Энтерогеморрагические кишечные палочки (ЭГКП, например, E. coli О157:Н7) с преобладанием геморрагического фактора, вызывающего гемолитический уремический синдром. Поражается толстая кишка | Пили, шигаподобные | Геморрагический колит(диарея с примесью крови); гемолитико- уремический синдром |
Энтероаггрегирующие | Плазмидоопосредованное аггрегативное прикрепление, предупреждающее абсорбцию жидкости | Диарея у детей |
Микробиологическая
диагностика. Основной метод –
бактериологический. Определяют вид чистой
культуры (грамотрицательные палочки,
оксидазоотрицательные, ферментирующие глюкозу и
лактозу до кислоты и газа, образующие индол, не
образующие H2S) и принадлежность к
серогруппе, что позволяет отличить
условно-патогенные кишечные палочки от
диареегенных. Внутривидовая идентификация,
имеющая эпидемиологическое значение,
заключается в определении серовара с помощью
диагностических адсорбированных иммунных
сывороток.
Источник
Кишечная палочка (Escherichia coli) – условно-патогенная бактерия палочкообразной формы, которая обитает и развивается только в условиях отсутствия кислорода. Таким местом является кишечник человека. У нее есть патогенные и непатогенные разновидности, которые при нормальном количестве совершенно не вредят, а, наоборот, участвуют в синтезе витаминоподобных соединений. Патогенные микроорганизмы вызывают тяжелые заболевания, поэтому требуют лечения.
Способы заражения
Вспышки кишечной палочки имеют сезонный характер. Чаще эпидемии встречаются в летние месяцы. Основные пути инфицирования:
- орально-фекальный – после контакта с зараженной фекалиями водой и почвой, а также с овощами, которые на ней выросли;
- контактно-бытовой – от больного человека через предметы общего пользования (такой способ менее распространен, нежели первый);
- из воспаленных органов мочеполовой системы;
- передача escherichia coli от матери ребенку во время родов.
Последний способ передачи является самым опасным, с большим количеством осложнений. Иммунная система новорожденного ослаблена, поэтому организм не в состоянии бороться с E. Coli. Бактерия быстро размножается, поражает мозг, вызывая менингит.
Инкубационный период составляет 3-8 дней.
У новорожденных эшерихия коли бывает гемолитической и лактозонегативной. Повышение уровня первой разновидности должно вызвать опасение у врачей. Лактозонегативная палочка должна присутствовать в кишечнике, но ее норма составляет 105. Превышение нормальных показателей приводит к появлению непереваренных частиц пищи в каловых массах, а также к чередованию запоров и диарей.
Основным источником заражения кишечной палочкой является крупный рогатый скот. Вместе с испражнениями животного выделяются бактерии, которые попадают в почву и водоемы. Мясо, прошедшее недостаточную тепловую обработку, а также непастеризованное молоко является источником заражения.
Предрасполагающие факторы для заражения – несоблюдение правил личной гигиены, снижение защитных свойств организма, неблагоприятная эпидемиологическая обстановка, посещение стран с высоким уровнем загрязнения воды и почвы.
Типы
Все бактерии группы кишечной палочки (БГКП) можно поделить на условно-патогенные и патогенные. Последних насчитывается более 100 штаммов. Именно они вызывают кишечные инфекции. Среди основных видов кишечных палочек можно отметить:
- Энтероинвазивные. Симптоматика инфекции схожа с дизентерией.
- Энтеропатогенные. Чаще заселяют тонкую кишку грудничков.
- Энтеротоксигенные. Вызывают болезни желудка, симптомы которых проходят на 3-5 сутки без медикаментозного лечения.
- Энтерогеморрагические. Сопровождается развитием колита и уремического синдрома, приводит к стремительному ухудшению самочувствия.
Все патогенные кишечные палочки могут вызвать инфекционные заболевания (эшерихиозы). Все E. Coli на протяжении длительного времени могут сохранять жизнедеятельность во внешней среде — в кале, воде и почве. Бактерию убивают некоторые химические соединения, а также воздействие температур выше 70 ˚С.
Симптомы
Общее ухудшение самочувствия и нарушение пищеварения – основные симптомы кишечной палочки. Кишечная инфекция может протекать по типу энтероколита, пищевого отравления, дизентерийной или холероподобной инфекции, геморрагического колита. Симптомы зависят от разновидности микроорганизмов, поэтому каждый класс нужно изучать более подробно.
Энтеропатогенные симптомы кишечной палочки
Данный возбудитель вызывает тошноту, рвоту, боль в желудке, сильную диарею и высокую температуру тела. Каловые массы обильные водянистые. Чаще диагностируется такая форма эшерихиоза у детей до года.
Читайте подробнее про диарею у детей на сайте Mama66.ru.
Энтеротоксигенные симптомы кишечной палочки
Причиной возникновения эшерихиоза чаще становятся грязные руки, а также немытые овощи и фрукты. Кишечная палочка крепко прикрепляется к слизистой кишечника, поэтому симптоматика ярко выраженная.
Признаки:
- обильные водянистые испражнения;
- приступообразная боль в животе;
- тошнота и рвота;
- слабость;
- мышечная и суставная боль;
- повышение температуры тела.
Проявления бактерии данной группы кишечной палочки часто называют «диареей путешественника».
Энтерогеморрагические симптомы кишечной палочки
Бактерии данной группы кишечной палочки приводят к наиболее тяжелым последствиям. Гемолитическая E. Coli сопровождается развитием острой гемолитической анемии, поскольку разрушаются кровяные тельца. Это может привести к смерти пациента, поэтому важно вовремя распознать заражение.
Симптомы:
- диарея с примесью крови;
- тошнота, рвота;
- отсутствие аппетита;
- слабость;
- головная боль;
- лихорадка, высокая температура тела;
- боль в желудке.
У детей бактерии данной группы кишечной палочки имеют особенности – вздутие живота, жидкий кал со слизью и частицами непереваренной пищи, срыгивания, рвота, повышение температуры тела, плаксивость и беспокойность.
Данная разновидность escherichia coli возникает у детей, пожилых людей и женщин после родов.
Симптомы всегда появляются внезапно и остро. Кроме разрушения кровяных телец, происходит поражение почечных канальцев и клубочков. Развивается ишемия сосудов почечных клубочков, а затем острая почечная недостаточность. В результате токсического воздействия появляется гемолитическая желтуха, кожный покров приобретает лимонно-желтый оттенок.
Энтероинвазивные симптомы кишечной палочки
Бактерия данной группы кишечной палочки чаще встречается у детей, вызывая при этом такие симптомы:
- жидкий стул с примесью крови;
- боль внизу живота;
- слабость;
- отказ от еды;
- головную боль;
- повышение температуры тела.
Кишечная палочка и мочеполовая система
Кишечная палочка, попадая в органы мочевыделительной или половой системы, приводит к заболеваниям этих органов. Распространены болезни, вызванные E. Coli:
- цистит;
- пиелонефрит;
- уретрит, простатит, эпидидимит и орхит у мужчин;
- аднексит, вульвовагинит, эндометрит, кольпит у женщин;
- перитонит.
Эшерихия коли проникает из прямой кишки в уретру и мочевой пузырь восходящим путем. Есть предположения, что передается палочка половым путем от зараженного партнера.
Инфекционные болезни, вызванные кишечной палочкой, трудно поддаются лечению. Бактерия ослабляет местный иммунитет, из-за чего высока вероятность заражения гонококками, стафилококками и другими опасными микроорганизмами. Может развиться хламидиоз или гонорея.
Одновременно с мочеполовыми болезнями возможны осложнения со стороны пищеварительного тракта, например, пиелонефрит часто сопровождается острым панкреатитом.
Полезное видео о кишечной палочке
Какой врач лечит эшерихиоз?
Диагностикой и лечением эшерихиоза занимается инфекционист.
Норма кишечной палочки
Кишечная палочка – микроскопическая бактерия. Ее характеристика:
- грамотрицательный микроорганизм;
- размер всего 2х0,6 мкм;
- устойчива в окружающей среде;
- оптимальная рН 7,2-7,4;
- подходящая температура – 37 ˚С.
Непатогенные штаммы входят в состав микрофлоры здорового человека. В норме их число варьируется от 106 до 108 КОЕ/г. Ими заселяется кишечник в первые дни рождения младенца.
Если нормальное количество микроорганизмов превышено, то E. Coli. оказывают токсическое воздействие, поэтому нужно лечение.
Анализы
Основу обследования для постановки диагноза составляет лабораторная диагностика эшерихиозов. Она предполагает:
- анализ крови;
- анализ мочи и кала;
- копрограмма, кал на дисбактериоз;
- мазок из влагалища и уретры;
- анализ рвотных масс;
- анализ мочи на ацетон.
В результате полученных в ходе обследования данных можно судить о состоянии микрофлоры кишечника, тяжести интоксикации организма, а также определить вид и класс бактерий, их устойчивость к антибиотикам.
Если эшерихия коли обнаружена в крови, то это свидетельствует о тяжелом состоянии, которое может закончиться летальным исходом. Такие пациенты подлежат срочной госпитализации.
Лечение
Самостоятельно лечить кишечную палочку недопустимо. Симптомы эшерихиоза схожи с другими инфекционными заболеваниями, поэтому в домашних условиях невозможно подобрать адекватную терапию. Все медикаменты назначаются только после результатов бактериального посева. Лечение кишечной палочки возможно исключительно при помощи антибактериальных препаратов.
Основные медицинские мероприятия при escherichia coli:
- госпитализация (для маленьких детей и пациентов с обезвоживанием);
- постельный режим;
- медикаментозная терапия (антибиотики, пробиотики, детоксикационные средства, регидратация);
- диетическое питание (диета №4 при поражении кишечника и стол №7 при болезнях почек и мочеполовой системы).
Медикаментозная терапия в первую очередь направлена на предотвращение обезвоживания организма, сохранение жизненно важных функций и предупреждение осложнений со стороны ЖКТ и мочеполовой системы.
Лечение эшерихиоза при помощи медикаментов выглядит так:
- антибиотики цефалоспорина и фторхинолона – Левофлоксацин, Моксифлоксацин, Цефаприм, Цефазолин, Цефепим;
- бактериофаги (препараты, содержащие вирусы, которые убивают кишечную палочку) – Коли жидкий;
- пробиотики (обязательно при дисбактериозе) – Хилак форте, Линекс, Аципол, Энтерол;
- энтеросорбенты (для снятия симптомов интоксикации) – Смекта, Энтеросгель, Полисорб;
- регидратационные растворы (для профилактики обезвоживания, вызванного рвотой и диареей) – Трисоль, Регидрон;
- жаропонижающие препараты (при температуре выше 38 ˚С) – Парацетамол, Панадол, Ибупрофен.
Бактериофаги обладают выраженным терапевтическим эффектом. Они убивают возбудителя escherichia coli, поэтому выздоровление наступает быстрее, нежели при антибактериальной терапии.
Если кишечная палочка привела к развитию осложнения в виде менингита, пиелонефрита, холецистита или сепсиса, то обязательно применяются антибиотики цефалоспориновой группы, например, Цефуроксим.
Выраженное обезвоживание, которое сопровождается электролитными нарушениями лечится с помощью инфузионного введения растворов.
Антибактериальное лечение длится 5-7 дней. После выздоровления пациент должен 2-3 недели принимать пробиотики, например, Бифидумбактерин, а также соблюдать диету.
Профилактика
Все профилактические мероприятия эшерихия коли сводятся к следующим рекомендациям:
- соблюдать правила личной гигиены;
- тщательно мыть овощи и фрукты;
- соблюдать правила термической обработки мяса;
- не пить сырое молоко;
- приобретать мясные и молочные продукты только у проверенных продавцов с сертификатом качества на товар;
- укреплять иммунитет;
- регулярно проводить влажную уборку в доме.
При первых симптомах кишечной палочки необходимо немедленно посетить врача. После выздоровления нужно показаться доктору на 6-8 день, чтобы исключить появление рецидива.
Кишечная инфекция распространена среди взрослых и детей. Она не только сопровождается тяжелой симптоматикой, но и может привести к сильному обезвоживанию, нарушению важных функций организма, а также смерти пациента. Важно соблюдать профилактические меры и лечить кишечную палочку при первых проявлениях.
( 48 оценок, среднее 4.29 из 5 )
Источник
Данный метод окраски является базовым в микробиологии, т.к. на его основе бактерии классифицируются на две большие группы – грамположительные и грамотрицательные. Основой данного подразделения бактерий является их отношение к даннной окраске. Изначально бактерии не имеют цвета, т.е. прозрачны. Но за счет различного строения своих оболочек они по-разному воспринимают тот или иной краситель. И данное свойство воспринимать окраску – строго врожденное, видовое и практически неизменное. Поэтому такое свойсво бактерий (свойство восприятия краски) и легло в основу их классификации. Деление бактерий на грамположительных и грамотрицательных можно встретить, например, в любой инструкции к антибиотикам.
При классической окраске по Граму чаще применяются такие компоненты: карболовый раствор генцианового фиолетового, карболовый раствор фуксина, раствор Люголя, спирт этиловый. Концентрированный карболовый фуксин называется еще фуксин Циля, разведенный водой – фуксин Пфейфера. Все наименования компонентов по фамилиям ученых (как и собственно само название метода: по Граму).
Методика проведения окрашивания.
Предметное стекло перед исследованием обезжиривают и делают на нем мазки исследуемых культур. Мазки следует делать тонкими, чтобы клетки равномерно распределялись на поверхности стекла и не образовывали скоплений. Препарат высушивают при температуре 20-22 0C, фиксируют над пламенем горелки (спиртовки).
1. На фиксированный мазок нанести раствор генцианового фиолетового на 1-2 мин.
2. Не промывая водой, нанести на препарат раствор Люголя и выдержать 1 мин – до полного почернения мазка.
3. Раствор Люголя слить и обесцветить мазок 70% спиртом этиловым, несколько раз наливая его на предметное стекло и покачивая стекло. Процесс обесцвечивания считается завершенным, когда от мазка перестают отделяться окрашенные в фиолетовый цвет струйки жидкости (но не более 30 сек.).
4. Препарат промыть водой.
5. На препарат нанести на 1-2 мин раствор карболового фуксина, разведенного 1:9 водой (фуксин Пфейфера).
6. Краску слить, препарат промыть водой, осушить фильтрованной бумагой или высушить на воздухе, и микроскопировать с иммерсионной системой.
Грамположительные микроорганизмы окрашиваются в сине-фиолетовый цвет, грамотрицательные – в красный. Поэтому основополагающим здесь является результат окраски – цвет. По инструкции все бактерии красятся одними и теми же красителями, а в итоге получается разный цвет. Почему? Все заключается в строении клеточной стенки. У одних бактерий она толстая, и поэтому глубоко прокрашивается фиолетовым красителем, не воспринимая уже последующий краситель. Это будут грамположительные бактерии. А у других клеточная стенка тонкая. Первым красителем она так же окрашивается, но потом вымывается спиртом и докрашивается вторым красителем.
Набор для классической окраски по Граму
Если схематично описать метод, то происходит следующее:
– окраска бактерий в фиолетовый цвет (генциановым фиолетовым) – все бактрии становятся фиолетовыми;
– прочная связь красителя в толще оболочки с молекулами йода (при добавлении раствора Люголя) – мазок приобретает бурый цвет;
– обесцвечивание тонкостенных бактерий этиловым спиртом (вымывание красителя из оболочки) – толстостенные бактерии остаются фиолетовыми, тонкостенные становятся бесцветными;
– докрашивание в красный цвет – толстостенные бактерии остаются фиолетовыми, тонкостенные перекрашиваются в красный цвет.
Грамположительные кокковые колонии. Увеличение 1000х.
Помимо классической методики существует и множество модификаций: модификация по Эткинсу, по Калине, по Синеву, по Николля и др. Суть практически везде сохраняется, но немного изменена сама методика окрашивания, либо заменены красители на другие. Например, фуксин часто заменяется на 2% раствор сафранина. Это вносит определенное удобство в работу, т.к. разведенный водой фуксин (фуксин Пфейфера) не очень стоек (хранится 1-2 суток), и приходится каждый раз готовить свежий раствор, а раствор сафранина не требует разведения и используется без подготовки.
Примечательна методика окраски по Граму в модификации по Синеву. Специфика окраски заключается в том, что вместо растворов красителей используются кусочки фильтровальной бумаги, которые заранее пропитываются данными расворами и высушиваются. Окраска происходит при наложении сухой окрашенной бумажки на мазок и нанесении капли воды на бумажку. Бумага мгновенно пропитывается и краситель вымывается на мазок.
Набор для окраски по Граму в модификации по Синеву
Какие возможные ошибки бывают при окраске по Граму и как с ними не столкнуться?
Чаще это ошибки технического характера.
1. Все бактерии в итоге грамположительные. Такое действительно бывает, когда, например, в мазок попали колонии стрептококков, стафилококков и др. (они по природе практически все грамположительные). Но если рассматривать с позиции ошибки, то это случается, когда мазок недостаточно контактировал со спиртом, т.е. не обесцветились тонкостенные бактерии. В итоге все остались фиолетовыми.
2. Все бактерии в итоге грамотрицательные. Если опять отмести возможность присутствия только действительно грамотрицательных бактерий, то ошибка заключается в обратном. Т.е. в переобесцвечивании спиртом. В итоге все обесцвечиваются, и все перекрашиваются в красный цвет. Поэтому при нанесении спирта очень важно соблюдать время контакта с мазком.
3. Отсутствие бактерий в мазке. Это из-за неправильного забора материала, или неправильной фиксации материала (все бактерии смываются при первой же отмывке).
4. Мазок не побурел при нанесении раствора Люголя. Причина – испорченный раствор. Раствор Люголя предпочтительно хранить в стеклянной емкости, из пластиковой емкости со временем йод улетучивается, а сам раствор становится светло-коричневым. Как итог – все бакетрии могут получиться грамотрицательными.
5. Большие фиолетовые образования правильной круглой формы, видимые в микроскоп. Это не кокки – это несмытые капельки генцианового фиолетового после некачественной промывки спиртом.
6. Бактерии в виде объемных нагромождений. Причина в недостаточном распределении бактерий по стеклу на начальном этапе. Мазок нужно равномерно распределять тонким слоем.
7. Другие ошибки. Это может быть несоблюдение времени окраски (недокрашивание, перекрашивание), несоответствие концентрации спирта, чрезмерная тепловая фиксация мазка и т.п.
Небольшие хитрости в вопросах-ответах.
Можно ли использовать аптечный раствор Люголя? Нет! Он другого состава.
Можно ли использовать аптечный этиловый спирт? Да. Но главное чтобы был без добавок типа хлоргексидина, муравьиной кислоты и т.п.
А водку вместо спирта? Нет, в ней недостаточная концентрация спирта, надо 70%.
Можно ли заменить этиловый спирт на изопропиловый? При необходимости можно. Но немного сократить время контакта с мазком.
Можно ли использовать химическую фиксацию вместо тепловой? Да, но это немного сложнее. (Об этом в другой статье).
Как использовать мазок многократно? Очень удачный препарат можно еще несколько раз в дальнейшем просматривать, не смотря на то, что на мазке находится иммерсионное масло. Удалить его никак не получится. Но можно стекло с мазком защитить от пыли помещением в футляр. А в дальнейшем наносить новую каплю масла и вновь микроскопировать.
Подводя итог сказанному, главное – придерживаться методики. Методика сама по себе не строгая, но ошибки на начальных этапах случаются. После нескольких окрашиваний всегда можно понять недочеты и в дальнейшем их легко предотвращать, получая очень красивые и качественные результаты.
Источник