Современные методы выявления дисбактериоза кишечника микробиология

В отечественной практике диагностика и микробиология неотделимы друг от друга. Анализ кала даёт представление о составе флоры в толстой кишке. На этом диагностика дисбактериоза обычно заканчивается. Мамы собирают кал у грудничка, доктор ставит диагноз, составляется диета, подбираются смеси. Всякий, ощутивший зуд в заднем проходе, может попробовать аналогичный алгоритм действий. Однако, дисбактериоз оказывает тотальное влияние не только на ЖКТ. Алопеция, себорея порой служат симптомами либо являются прямым следствием дисбактериоза.

Не всякий образованный человек понимает, что причины избранных болезней берут начало в ЖКТ. Тяжёлый дисбактериоз служит причиной рака, прочих заболеваний, исключение – СПИД. В западных школах медицины на протяжении десятков лет утверждают, что диагностика одной толстой кишки не имеет практического смысла. Это состояние воспринимается следствием прочих заболеваний. В РФ доказали, что дисбактериоз у кормящей мамы ведёт к немедленному пополнению списка больных новорождёнными младенцами (на третьи сутки максимум).

Читайте также дополнительные материалы, это важно знать.

Микрофлора

Установлено, что совокупная численность микробов (500 видов) в человеке достигает десяти в 14 степени, что на порядок больше, нежели количество клеток, составляющих организм. Подавляющая часть флоры обитает в кишечнике, общим весом 1-2 кг. Традиционный бактериологический анализ затрагивает 10-15 видов из массы. Реальная картина происходящего в кишечнике отличается от результата анализа.

Типичные признаки, сопровождающие заболевание, к примеру, стафилококковый дисбактериоз кишечника, чётко описаны. Многие заболевания недостаточно изучены. Метеоризм при дисбактериозе наблюдается у большого количества пациентов. Но выделение газов происходит регулярно, человек на любой стадии развития постоянно выделяет водород и метан. Диагностика показывает – штаммы, не являющиеся частью нормальной микрофлоры, провоцируют обширное газообразование, сравнительно с нормой. Механизм вздутия слабо изучен, штаммы, его вызывающие, не определены до настоящего времени.

Получается, человек, исследуя океан и Луну, не знает многого о собственном теле. Не всякая мать сможет объяснить необходимость прикладывания ребенка к груди уже через 2 часа после родов. Таким образом происходит переход к формированию нормальной микрофлоры кишечника новорождённого.

Микрофлора кишечника

Не удивительно, что диагностика находится на низком уровне. При анализе необходимо учитывать разницу показателей у детей до года и детей старшего возраста. Игнорирование информации приведёт к неправильному диагнозу. Полное формирование микрофлоры заканчивается в 2 года.

Причин нарушению баланса изучено немало. К примеру, приём антибиотиков после операции. Лишь каждый десятый признан абсолютно здоровым в подобных условиях.

Методики исследования

Постоянно появляются новые методики исследования. К примеру, в 2001 году Hopkins предложил использовать молекулярно-генетический способ гибридизации 16 SrPHK. С высокой точностью определяются виды (что важно), но трудоёмкость и сложность подбора реактивов затрудняют исследования. Молекулярный метод основан на выявлении участков ДНК взаимодействующих видов при помощи электрофореза (либо отличающимся способом).

Метод ГХ-МС имеет немало общего с названным, ориентируется на ряд жирных кислот, производство которых тесно связано со структурой ДНК. Набор ЖК аналогичен «отпечаткам пальцев» исследуемой бактерии. Удаётся подобным образом идентифицировать несколько тысяч штаммов, в организме видов культур около 500. В последнее десятилетие серийно выпускается оборудование в указанной области. Остаётся составить карту наличия жирных кислот в продуктах жизнедеятельности определённых бактерий.

Сегодня ГХ-МС позволяет получить информацию о сотнях видов. Гораздо больше, чем любая методика. Точное определение возбудителей важно для выбора лечения. В результате выявляются патологии: выпадение волос, лишний вес, дерматиты, жжение в заднем проходе. Распознается набор штаммов, влияющий на развитие патологических состояний. В подобных случаях важна точная диагностика, для недопущения развития заболевания.

Исследование фагочувствтительности

Данные о фагочувствительности при помощи ГХ-МС заполучить чрезвычайно сложно. Сбор показаний зависит от чувствительности оборудования. В обычных условиях культура проращивается, уничтожается определённым образом (к примеру, при помощи грибов). Исследование включает улавливание специфичных веществ, служащих результатом успешной борьбы, позволяет составить прогноз заболевания, предоставляет информацию, эффективен ли воздействующий фактор.

Бактериологический анализ

Из горла берут мазок при выявлении заболеваний дыхательной системы, кровь сдают для оценки биохимических показателей, напрямую показывающих, здоров человек либо болен. Диагностика при дисбактериозе кишечника основывается на исследовании кала. По-другому проверить, что творится в недрах ЖКТ, затруднительно. На западе посев на питательные среды считают методом ненадёжным по перечисленным причинам.

Читайте также:  Продукты вызывающие дисбактериоз кишечника

Сложно выдержать идеальные условия

Правильный способ диагностического забора кала.

  1. Нужна герметичная стеклянная посуда, иначе воздух убьёт анаэробные бактерии (облигатная часть флоры).
  2. Маленькая посуда – воздух под крышкой уничтожит бифидобактерии и лактобациллы.
  3. Немедленно после сбора кала в количестве минимум 1 грамма следует плотно закупорить сосуд.
  4. Хранить анализ следует при температуре +4 градуса в течение четырёх часов. Получается, для выполнения условия банка должна оказаться на столике в лаборатории немедленно.

На западе трезво оценивают возможности лаборантов. Известно: открытие пенициллина произошло благодаря подобному нарушению. Александр Флеминг не выдержал идеальные условия выращивания опасного стафилококка. Вместе со штаммом на питательной среде поселился пенициллин.

Результат неточен

Забор кала предоставляет информацию о микрофлоре определённой части толстой кишки. Желательно анализу подвергать мукозную часть флоры, не полостную, как часто происходит в случае исследования фекалий. Непосредственно в слизистой происходят процессы формирования витаминов, всасывание микроэлементов. Кроме прочего, бактерии в экскрементах преимущественно мертвы.

По указанным причинам традиционный посев фекалий не является лучшим методом.

Суть метода

Суть заключается в посеве экскрементов на питательную среду. Бактерий множество, для каждого вида среда индивидуальна. По скорости роста штамма делаются выводы о начальной численности, оперируя таблицами норм. Сверяясь с данными, выставляется диагноз (отклонения популяции в меньшую либо большую сторону).

В заключение производится анализ обнаруженной условно-патогенной флоры на чувствительность к антибиотикам, назначается эффективный курс лечения. В комплексе, подобными мероприятиями ограничивается бактериологическая диагностика дисбактериоза кишечника.

ГХ-МС

Газовая хроматография в сочетании с масс-спектрометрией предоставляет преимущество в диагностировании, занимающее до 5 часов. Происходит в десятки раз быстрее, нежели выращивать экскременты. Методика не ищет живые бактерии, нацелена на обнаружение метаболитов микрофлоры, упрощающего процесс сбора анализов. Удешевляется сама операция, поскольку необходимость закупать дорогостоящую (преимущественно, патогенную) микрофлору отсутствует. Сложность резко снижается.

Врачи давно полагали, что существуют следы жизнедеятельности микроорганизмов, выбрасываемые в окружающую среду. Избыточный удельный вес результатов в испражнениях говорит о развитии определённого состояния. Результат интересен: в экскрементах присутствует полостная флора, и полный спектр метаболитов! Следовательно, живущие внутри организма виды бактерий (и грибов) определятся по следам метаболизма.

Рассказывая о гибели группы Дятлова, Ракитин говорил: по набору изотопов можно немало узнать о рабочем веществе реактора. Аналогия наблюдается в случае с микроорганизмами. Отходы жизнедеятельности сильно отличаются друг от друга, спутать затруднительно. Род определяется с точностью, определение вида допускает малую погрешность.

Георгий Осипов лестно отзывается о ГХ-МС. В первую очередь приводит доводы в пользу стоимости оборудования, упоминает о дешевизне расходных материалов. Не забывает про точность метода (до 2%). Завершающим доводом становится широкий спектр микроорганизмов, подверженных идентификации. Фактически, составляется полнейшая копрограмма, чрезвычайно сложная и затратная для получения традиционными методами.

Неотъемлемой частью методики является постоянство метаболитов. Доказано – за последние 2,5 млрд. лет процесс жизнедеятельности бактерий практически не менялся. Ошибочно полагать, что методика нова. Упоминания встречаются с 70-х годов XX века, первые серьёзные исследования проведены на базе РАМН в 90-е.

Суть метода

Проводится химическая реакция (к примеру, метанолиз) для выделения из пробы нужных компонентов. Превращение жирных кислот в метиловые эфиры лежит в основе анализа. Для указанного соблюдаются нужные условия, подготовка пробы занимает определённое время. Композиция эфиров представляет жидкость либо газ, вводимый в аппаратуру. Разделение производится на капиллярной колонке.

Получается гистограмма, где маркеры разделены расстоянием. Площади пиков интегрируются, выступая исходными данными дальнейших расчётов. Для любой молекулы сформированы признаки, используемые при идентификации. База данных покупается отдельно, исследование стоит денег. Возможности метода немало зависят от наличия информации. Недостаток веществ в базе данных делает невозможным идентификацию.

Читайте также:  Анализ на дисбактериоз кишечника в орле

Спектр действия ГХ-МС крайне широк. Типичная база содержит признаки 1000 и более видов. Сообразно представленным данным, вычисляется плотность популяции штаммов.

ПЦР-диагностика

Лабораторная диагностика дисбактериоза не ограничивается двумя методиками. Потому что у врачей всегда должен быть выбор. Когда нет конкуренции, отсутствует и прогресс. Полимеразная цепная реакция работает с ДНК. Изобретена в 1983 году Кэри Мюллисом.

В заданных условиях происходит копирование имеющегося участка молекулы. Реакция проходит в пробирке под действием специальных ферментов. Зная последовательность нуклеотидов, легко предсказать результат. Постепенно открылись методы, минимизирующие число мутаций, результат анализа становится достоверным.

Длина копируемого участка ограничена, составляет 3000 звеньев. Для сравнения – геном человека кодируется при помощи 3 млрд. пар. В науке метод ПЦР часто используют для внесения намеренных мутаций в код ДНК. Это проверенный способ криминалистов вынести вердикт, сильно влияющий на решение суда. Сходство генов – надежное доказательство вины либо невиновности.

Какой анализ выбрать

У пациента клиники нет выбора. Сегодня диагностика проводится исключительно бактериологическая. На фоне дисбактериоза, осложнённого диареей, ожидание в течение 1 недели невыносимо. Как питаться больному ребёнку? Что делать взрослому?

Настоятельно рекомендуем внимательно собирать о симптомах нужную информацию. Если возникает аллергия из-за дисбактериоза, записывайте данные о местах возникновения дефектов. К примеру, аллергический вид крыльев носа указывает на дефицит витамина В. Покраснение в районе волосяной части головы – симптом себореи.

Как избежать

Диагностика по клиническим признакам сложновыполнима. Поможет информация о консистенции кала, цвете, запахе. Если грибковый дисбактериоз вызвал стоматит, немногие знают, с чего начинать лечение. Попутно с типичными в подобных случаях препаратами проводится диагностика баланса микрофлоры кишечника. Заодно оказывается помощь желудку.

На сайте представлена исчерпывающая информация по дисбактериозу, способная оказать весомую помощь. Полезно употреблять в пищу клетчатку, олигосахариды. Упоминалось о роли народных средств: пейте травы. Рост патогенной флоры подавляется при помощи ягод:

  • земляника, черноплодная рябина, черника, малина, чёрная смородина помогают в отношении сальмонелл и стафилококка;
  • абрикосы, клюква уничтожают микробы гниения;
  • голубика, брусника борются с Candida.

Включайте указанные продукты в рацион, практикуйте введение прикорма при дисбактериозе детям, формируя иммунитет. Детям младшего возраста дают отжатые соки. При лактазной недостаточ­ности сделайте акцент на бифидобактерии., растущие на молочном сахаре, играющие роль источника лактазы (либо заменителя). Покупайте ферменты отдельно, в аптеке.

Упорно продолжайте кормление грудью младенцев (не из бутылочки), правильным образом формируя внутреннюю микрофлору ребёнка. При запорах делайте акцент на продукты питания:

  1. Чёрный хлеб.
  2. Варенье.
  3. Мёд.
  4. Сироп.
  5. Овощи.
  6. Сахар.

Диарея устраняется известными народными средствами. Употребляют продукты с танином: заварка (запивается водой), сушёная черника, корки лимона и граната, горошины чёрного перца, столовая ложка крахмала. Полезно употреблять сыр, творог, добавлять кальций к ежедневному рациону.

Источник

Симптомы дисбактериоза кишечника присущи многим другим заболеваниями. В связи с этим для диагностики заболевания применяют множество специфических мер.

Дисбактериоз – клинические проявления

Современная диагностика дисбактериоза

Как правило, устанавливают диагноз дисбактериоз на основе клинической картины развития заболевания. Основными клиническими проявлениями заболевания, которые общие, как и для взрослых, так и детей, являются:

  • нарушение общего самочувствия (обезвоживание, интоксикация);
  • снижение веса;
  • симптомы поражения слизистых желудочно-кишечного тракта;
  • нарушение процессов пищеварения в любом из отделов ЖКТ.

Однако для того чтобы был установлен точный диагноз необходима лабораторная диагностика дисбактериоза.

Современные методы диагностики дисбактериоза

В современной медицине существует множество методов диагностики нарушения микрофлоры кишечника. Разделяют два типа диагностики дисбаланса флоры: прямые и косвенные.

Прямые способы диагностики дисбактериоза

Сегодня самым распространенным лабораторным методом исследования выступает бактериологический анализ кала на дисбактериоз (посев). Однако общую картину состояния пациента данный анализ не дает, так как он показывает лишь состояние тех микробов, что расположены в толстой кишке, а точнее в его конечно отделе. К сожалению, о состоянии микрофлоры тонкого кишечника данный анализ рассказать абсолютно не сможет.

Более того, бактериологическая диагностика дисбактериоза кишечника представляет заключение минимум 14, а максимум 25 видов бактерий, несмотря на то, что в кишечнике обитает их более четырех сотен.

Читайте также:  Дисбактериоз кишечника медицинская энциклопедия

Получение достоверных результатов посева на дисбактериоз возможно лишь при условии полной стерильности, правильной транспортировке материала (соблюдение необходимого температурного режима), а также проведение анализа фекалий спустя не более трех часов после их забора. К огромному сожалению, в наши дни такими условиями могут располагать лишь единицы лабораторий и именно по этой причине, как правило, получаемые результаты анализов уже искажены.

Однако, несмотря на это данный метод диагностики дисбактериоза имеет явное преимущество. В сравнении с другими видами анализов, проводимых при установлении дисбаланса кишечника, он самый дешевый и при его помощи можно определить количество и вид микробов. Правда, длительность проведения составляет одну неделю.

О состоянии флоры тонкого кишечника можно получить информацию после посева биоптата стенок кишечника либо аспирата, который содержится в нем. Правда, данные исследования довольно сложные с технической стороны и их проводят исключительно в крайних случаях.

В последние годы все больше используют ПЦР-диагностику дисбактериоза (полимеразная цепная реакция). Популярен метод тем, что он весьма универсален, а именно для проведения данного исследования нет четких требований к материалу.

При исследовании кала на дисбактериоз при помощи ПЦР-диагностики в применяемом материале выделяют фрагмент ДНК либо РНК возбудителя. При этом стоит отметить, что выделенный фрагмент характерен лишь определенного возбудителя. В дальнейшем его достраивают до тех размеров, которые будут достаточны для визуальной регистрации.

Еще одной особенностью данного метода лабораторного исследования выступает его быстрота проведения. К тому же, при его помощи определяется наличие бактерии, если она даже присутствует только в одной клетке и расположена не рядом с просветом кишечника. Правда, данный анализ может быть точным при условии, что патогенные вирусы и бактерии известны. Другими словами круг исследования достаточно ограничен. В связи с этим ПЦР-диагностику проводят с целью определения проявившей себя инфекции.

Косвенные способы диагностирования дисбактериоза кишечника

Косвенные способы диагностирования дисбактериоза кишечника

Помимо прямых способов постановки диагноза «дисбактериоз кишечника» используют и косвенные. Речь идет о химических методах, во время которых собранный материал исследуют на концентрацию продуктов, выделяемых микроорганизмами в процессе своей жизнедеятельности. Вот именно на их основании и делают выводы и количестве и качестве бактерий в кишечнике. Речь идет о:

  • газожидкостной хроматографии, которая помогает определить в фекалиях наличие жирных летучих кислот;
  • масс-спектрометрие.

Такая диагностика дисбактериоза кишечника позволяет определить от 35 до 40 показателей. К преимуществам косвенного химического исследования баланса микрофлоры относят:

  • диагностирование анаэробной инфекции, которая на открытом воздухе погибает;
  • одновременное оценивание живых и мертвых организмов;
  • малые концентрации клеток вирусов и бактерий независимо от их происхождения;
  • короткие сроки проведения анализа, так как максимальное время его проведения составляет всего три часа.

Однако, несмотря на положительные стороны данного исследования, существуют его и отрицательные, а именно:

  • для анализа различных видов бактерий требуется проведения неоднократных исследований;
  • высокая цена оборудования;
  • сложность исследования с технической стороны.

Еще одни, правда, не популярные методы диагностики дисбактериоза выступают дыхательные тесты, при помощи которых возможно определить наличие патогенных микроорганизмов у человека, не прибегая к забору фекалий. Исследования проводятся выдыхаемого воздуха. Однако данный метод предполагает высокую вероятность ошибки. В связи с этим проведение дыхательного исследования используется для установления предварительных результатов.

Напоследок стоит подчеркнуть, что в наши дни диагностика дисбактериоза кишечника весьма сложная процедура. Причиной тому выступает отсутствие подлинной информации о нормальном составе микрофлоры кишечника, так как его изменения возможны из-за перемен погоды и климата. На кишечный баланс также влияет и смена рациона питания. В связи с этим результатов, которые дают возможность сделать однозначный вывод, современные методы диагностики не имеют. Все лаборатории руководствуются существующими условными данными, поэтому многие анализы на дисбактериоз обнаружат наличие заболевание даже при временных отклонениях.

Источник