Посев кала на дисбактериоз и чувствительность к антибиотикам и фагам

Необходимые анализы для диагностики дисбактериоза кишечника включают целый ряд исследований. В качестве биологического материала используют, как правило, фекалии. Исследование, направленное на определение чувствительности к различным бактериофагам, успешно дополняет другие анализы и помогает лечащему доктору определиться с диагнозом, чтобы назначить адекватное и правильное лечение.

Что такое бактериофаги?

Речь идет о внутриклеточной форме жизни. Иначе говоря, бактериофагами называют паразитирующие в клетке вирусы. Но исходя из названия становится понятно, что живут они в бактериях. Представляют собой ни что иное, как белковую молекулу, которая защищает спираль ДНК или РНК.

Бактериофаг размножается, используя ДНК или РНК бактериальной клетки, постепенно разрушая ее. Последняя гибнет, а частицы вируса захватывают жизненное пространство. Бактериофаги обладают специфичностью к определенным бактериям. Это нашло применение как в диагностике, так и лечении бактериальных инфекций.

Анализ на чувствительность к бактериофагам является важным методом в диагностике кишечных расстройств. Именно поэтому при подозрении на дисбактериоз этот метод очень актуален.

Когда назначается исследование и для чего используется?

Данный анализ входит в спектр исследований, необходимых для диагностики синдрома избыточного бактериального роста или дисбиоза. Гастроэнтерологи рекомендуют не ограничиваться посевом кала на дисбактериоз. Исследование позволяет определить качественный состав флоры кишечника. Можно даже обнаружить их количество при наличии современных тест-систем.

Самое важное, для чего и выполняется этот анализ, связано с возможным лечением.

Бактериофаготерапия может стать дополнением к уже назначенным антибактериальным средствам, либо альтернативным методом лечения при непереносимости или неэффективности последних. А для выбора бактериофага необходимо убедиться, что к нему чувствительна патогенная флора, на которую решено воздействовать.

Именно для этого проводится описываемый анализ. Еще одно важное применение для исследования на чувствительность к бактериофагам сводится к контролю над проводимым лечением. Анализ на чувствительность к бактериофагам используется не только в целях диагностики кишечного дисбиоза.

Обследование проводится в следующих областях медицины:

Причины возникновения дисбактериоза

Каждый орган, каждая часть тела человека представляет собой некий биоценоз. Иными словами, это совокупность существующих там бактерий. В желудочно-кишечном тракте обитают одни микроорганизмы, в то же время мочеполовую системы заселяют другие, а на коже обнаруживают третьи.

При некоторых ситуациях их количество и соотношение меняется. Иногда это становится причиной заселения патологическими бактериями. Эта ситуация и составляет суть дисбактериоза.

Причинных и предрасполагающих факторов развития этого патологического состояния существует много. В первую очередь, исключаются органические причины. Например, после операций. Очень часто баланс микрофлоры нарушается после удаления кишки по причине опухоли или кишечной непроходимости.

Среди операций, которые могут привести к дисбиозу, рассматривают ваготомию (для лечения язвы желудка), резекцию части желудка или двенадцатиперстной кишки. Формирование послеоперационных свищей предрасполагает к развитию дисбиоза кишечника.

Анализ на чувствительность к бактериофагам применяется для выявления дисбактериоза.

Следующая группа заболеваний связана с хроническим воспалением слизистой оболочки. Где бы ни был локализован этот патологический процесс, его обязательно будет сопровождать нарушение нормального соотношения полезных и условно-патогенных бактерий. Сюда относят илеиты, еюниты, дуодениты, колиты, а также циститы, уретриты, кольпиты, вагиниты, простатиты.

Нарушения моторной функции вызывают застой кишечного содержимого и тем самым создают благоприятные условия для заселения патогенной и условно-патогенной флоры. Для последних условия становятся настолько благоприятными, что они реализуют свои патогенные свойства и вызывают проявления дисбактериоза.

Эта ситуация возможна при сахарном диабете, когда формируется гастростаз в результате формирования автономной диабетической нейропатии как осложнения.

Ухудшение всасывания в результате нарушения функции поджелудочной железы или глистной инвазии отражается на работе кишечника в целом. Поэтому это следующий фактор риска развития дисбактериоза.

Дисбактериоз следует подозревать и исследовать при длительном употреблении антибиотиков. Это же касается пациентов, которые находятся на химотерапии по поводу онкологических заболеваний. Сюда относят и цитостатики, назначаемые при системных заболеваниях, ревматоидном артрите, гломерулонефритах.

Дисбиоз наблюдается при выраженном снижении иммунитета. Поэтому его исключают при ВИЧ-инфекции. У детей с первичным иммунодефицитом тоже необходимо исследовать кал на дисбактериоз.

Как правильно подготовиться к анализу

Любое обследование, в котором в качестве биологического материала выступает кал, требует подготовки. Она позволит предотвратить искажение результатов и появление ложноположительных или ложно-отрицательных интерпретаций.

В первую очередь, акцент ставится на диете. Исключаются мясные продукты. Лучше, если продукты из рыбы также не будут использоваться в пищу хотя бы за 3 дня до планируемого обследования. Не следует употреблять блюда из свеклы, которые красят биологический материал. Алкогольсодержащие напитки также рекомендовано исключить из рациона.

На лекарственные средства также лучше обратить внимание. Особенно это касается антибактериальных препаратов. Они убивают микрофлору, тем самым искажая результаты исследования.

Акт дефекации должен быть максимально естественным и произвольным. Следует стараться избегать приема слабительных препаратов. Перед актом опорожнения кишечника необходимо провести тщательную гигиену области промежности. Для этого промывают анус и перианальную область промыть теплой мыльной водой.

Анализ кала на дисбактериоз с определением чувствительности

Исследование применяется для диагностики дисбиотических нарушений. Назначает его доктор (терапевт, врач общей практики, педиатр или гастроэнтеролог). Анализ кала на дисбактериоз представляет собой посев кала на специальные питательные среды, в том числе, на чувствительность к бактериофагам.

При наличии в кишечном содержимом того или иного микроорганизма на чашках Петри в лаборатории вырастет целая колония бактерий. По их росту, интенсивности и количеству бактерий определяется дисбиоз и его степени тяжести.

Подготовка тары

В качестве посуды можно использовать маленькие стеклянные баночки из-под консервов, аджики, майонезе, джема. Но важно правильно обработать их. Лучше, если предварительно их промыть с любым моющим средством, а затем, смыв антисептик, прокипятить банку. Крышка подвергается такой же обработке.

В настоящее время большинство лабораторий предъявляет обязательные требования к таре для сдачи кала. Это должны быть одноразовые контейнеры. Их приобретение значительно упрощает задачу.

Сбор материала

Для того, чтобы не пытаться опорожнить кишечник в маленькую тару, лучше воспользоваться пищевой пленкой. Ее следует натянуть над унитазом. Затем после дефекации ложечкой, которая прикреплена к внутренней поверхности крышечки контейнера, нужно положить в него не более 10 г кала.

Сроки и условия хранения кала

Самый лучший вариант, при котором возможно максимально четко и полно сохранить весь микробиологический состав фекалий, это доставка анализа к лаборатории в течение 3 ч. Но это не всегда возможно, так как позывы к дефекации — не всегда контролируемый процесс. Особенно много проблем у пожилых пациентов, склонных к запорам.

Рекомендуется хранение биологического материала в условиях холодильника. Это ни в коем случае не должна быть морозильная камера.

Как правило, температурный оптимум для хранения фекалий составляет от 4 до 9 градусов. Поэтому такие условия можно найти лишь на средней полке. Боковые полочки также не подходят. В условиях комнатной температуры кал должен находиться максимум 15-20 мин. А в холодильнике при оптимальных температурных условиях до 8 ч.

Определение чувствительности к фагам

Анализ на чувствительность к бактериофагам важен как в диагностическом, так и в лечебном плане. Обычно он выполняется после микробиологического исследования или посева кала на флору. После того, как выделена чистая патогенная культура, проводится исследование на чувствительность ее к существующим в арсенале бактериофагам.

Как определяют чувствительность к фагам

Используется также микробиологический метод. По тому, насколько быстро и полно наступил лизис бактерий в выросшей колонии, оценивается чувствительность к бактериофагу. Буквой S отображается, что микробы чувствительны к вирусным частицам, а буква R говорит о наличии резистентности.

Для максимально информативного результата обследования необходимо использовать специальные твердые и полужидкие среды. В качестве бактериофагов применяют один моновалентный фаг, который направлен на конкретную выделенную ранее колонию бактерий.

Второй и третий фаг нужны для контроля. По своим свойствам они поливалентные, то есть неспецифические, и действуют на все виды бактериальных клеток.

Расшифровка результатов

Анализ на чувствительность к бактериофагам должен быть правильно интерпретирован. Для этого обращаются к терапевту или гастроэнтерологу. Иногда может понадобиться помощь инфекциониста.

Выделяют нормальные, условно-патогенные и патогенные бактерии. Нужно стремиться не допускать снижения количества первых, а также повышения на этом фоне количества бактерий 2-й и 3-й групп.

Нормальные бактерии

Это, в первую очередь, представители бифидобактерий. Их норма у детей — 10 000 000 000 — 100 000 000 000 КОЕ/г. Для взрослых их число несколько меньше — от 1 000 000 000 до 10 000 000 000 КОЕ/г. Заметное снижение количества этих полезных для кишечника бактерий приводит к дисбактериозу.

Вторая важная группа — лактобактерии. Для взрослых норма составляет 10 000 000 — 100 000 000 КОЕ/г. При заболеваниях кишечника и других состояниях их количество падает. Тогда реализуются все условия, чтобы выросло количество условно-патогенных микроорганизмов, и они реализовали свои патогенные свойства.

Условно-патогенные бактерии

Важно оценить не только количество выделенных микроорганизмов, но и состояние нормальной флоры. Если с ней есть проблемы (дефицит бифидо- и лактобактерий), следует говорить о дисбактериозе. Особенно это касается ситуаций, когда есть клинические признаки синдрома избыточного роста бактерий в кишечнике.

К условно-патогенным микроорганизмам относят:

• Клебсиеллу;
• Цитробактер;
• Протей;
• Энтеробактер;
• Хафнию.

Бактериофаги отлично дополнят анализ (посев) на микрофлору при подозрении на дисбактериоз.

Патогенные бактерии

В случае обнаружения даже минимального количества колоний представителей этой группы бактерий, следует активно лечить дисбактериоз. К ним относят Стафилококк, а также дрожжеподобные Кандиды, а также Энтерококки.

Важно определять их количество для дальнейшего мониторинга эффективности лечения. Бактериофаги необходимы для определения чувствительности к ним. Ведь при неэффективности к антибиотикам именно к фаготерапии придется обратиться к врачу.

Несмотря на то, что невозможно полностью предотвратить передачу патогенов, для минимизации вероятности инфекционных заболеваний, нужно поддерживать правильную гигиену.

Медицинский анализ, направленный на определение чувствительности или резистентности к определенным бактериофагам, служит хорошим подспорьем при наличии подозрений на дисбактериоз. Это очень перспективно в диагностическом плане, а также создает перспективу для развития отрасли фаготерапии как альтернативы антибиотикам.

Видео о бактериофагах

Фильм о бактериофагах:

Посев кала на дисбактериоз – бактериологическое исследование фекалий, позволяющее определить состояние кишечной микрофлоры. Это наиболее распространенный и доступный метод диагностики дисбактериоза кишечника у детей и взрослых.

Общее представление об исследовании

Образец кала, доставленный в лабораторию, разводят физиологическим раствором, обрабатывают на центрифуге и высевают на специальные питательные среды-агары. Затем чашки со средами ставят в термостат, где создаются благоприятные условия для роста и размножения микроорганизмов. Через 5-7 дней оценивают результат:

• определяют видовой состав микроорганизмов, выросших на питательных средах;
• подсчитывают количество колоний бактерий;
• при выявлении патогенной флоры проводят тест на чувствительность к бактериофагам и антибиотикам.

Как правильно сдавать анализ?

Для получения достоверного результата разработаны рекомендации по подготовке к процедуре, сбору и транспортировке биологического материала.

Подготовка к исследованию

Подготовку к сдаче анализа начинают за 72 часа:

• исключают из рациона острое, алкогольные напитки;
• по согласованию с врачом отменяют медикаменты, которые могут повлиять на результаты исследования: слабительные (таблетки и свечи), препараты железа и висмута, антибиотики, пробиотики;
• запрещено ставить клизмы;
• рентгенологические исследования кишечника с барием переносят на другое время.

Подготовка тары

Кал для бактериологического анализа собирают в стерильную ёмкость, которую нужно подготовить заранее:

• приобрести в аптеке специальный пластиковый контейнер с ложечкой для сбора фекалий;
• взять стеклянную баночку объемом 80-100 мл (например, от детского питания), простерилизовать ее в микроволновой печи примерно 3-5 минут, крышку прокипятить;
• в некоторых частных лабораториях выдают набор для анализа на дисбактериоз, в который входит ёмкость с питательной средой-консервантом, ложечка для сбора кала, перчатки.

Сбор материала

Кал на дисбактериоз собирают утром после пробуждения. Если не получается сходить в туалет после ночного сна, уточните в лаборатории время приёма анализов. Как правило, это первая половина дня.

1. Подготовьте место для сбора кала: возьмите судно, горшок или подкладную клеёнку, чисто вымойте и вытрите насухо. Запрещено собирать фекалии из унитаза. У маленьких детей допускается использовать пеленку или памперс.
2. Перед дефекацией помочитесь в унитаз. Кал не должен контактировать с мочой.
3. После дефекации возьмите подготовленную заранее тару, наденьте стерильные резиновые перчатки и ложечкой соберите материал из разных участков. Старайтесь, чтобы ложечка не касалась судна. Для проведения исследования требуется не менее 5 г фекалий – это комок размером с грецкий орех, в случае жидкого стула – уровень высотой 1,5-2 см.
4. Закройте крышку тары.
5. Подпишите на баночке свою фамилию, инициалы и дату рождения.

Сроки и условия хранения кала

Основные обитатели кишечника являются анаэробами, поэтому погибают под действием кислорода. Для получения достоверного результата собранный кал должен быть доставлен в лабораторию в течение 2 часов. Максимально допустимое время хранения биоматериала при температуре 4-8 °С составляет 6 часов. До отправки в лабораторию поставьте ёмкость в холодильник. Для транспортировки используйте хладагенты.

Расшифровка результатов

В кишечнике живёт более 400 видов бактерий. Примерно 20 из них имеют клиническое значение. В бланке результата анализа указывают основные микроорганизмы и их количество на 1 г биоматериала. Единица измерения – КОЕ/г.

Нормальные бактерии

Микроорганизмы этой группы составляют до 98% всех кишечных бактерий. Они участвуют в переваривании пищи, синтезе витаминов, сдерживают рост патогенной микрофлоры. Нормальные бактерии входят в состав препаратов-пробиотиков, которые назначают для коррекции дисбактериоза.

• бифидобактерии – 108 – 1010;
• лактобактерии – 106 – 108;
• типичные кишечные палочки – 106 – 108.

Условно-патогенные бактерии

Условно-патогенная флора присутствуют в каловых массах в небольшом количестве. Бактерии расщепляют компоненты пищи, стимулируют работу иммунной системы. Превышение допустимых норм нарушает работу пищеварительного тракта, провоцирует аллергические реакции.

• кишечные палочки лактозонегативные – не более 105;
• бактерии рода протей – не более 102;
• энтерококки – 106 – 107;
• дрожжеподобные грибы – не более 104.

Патогенные бактерии

Эти микроорганизмы вызывают инфекционные заболевания. У здоровых людей патогенные бактерии в каловых массах отсутствуют.

• сальмонеллы;
• шигеллы;
• золотистый стафилококк;
• синегнойная палочка;
• гемолитические кишечные палочки.

При выявлении патогенного микроорганизма указывают его вид и чувствительность к бактериофагам и антибиотикам.

Чтобы отличить истинный дисбактериоз от кратковременных дисбиотических реакций, посев кала назначают дважды с интервалом в 1 неделю. При стойких изменениях микробиоценоза кишечника результаты обоих анализов будут одинаковыми. Врач сопоставит полученные данные с клиническими проявлениями и определит дальнейшую тактику ведения пациента.